Альфа-галактозидаза A
(α-гал A)

Зачем проводить исследование активности альфагалактозидазы А (α-гал А)?

Наблюдаемое при болезни Фабри нарушение активности лизосомного фермента альфагалактозидазы А (α-гал А) приводит к накоплению гликосфинголипидов глоботриаозилцерамида (Gb₃) и глоботриаозилсфингозина (лизо-Gb₃) почти во всех видах клеток и разных органах^1–3. Некоторые мутации в гене GLA, кодирующем α-гал А, приводят к изменению ферментативной активности⁴. Уровень ферментативной активности α-гал А менее 1% указывает на наличие классической формы болезни Фабри^4,5. У пациентов с остаточной ферментативной активностью α-гал А на уровне более 3‒30%, как правило, развивается форма с поздним началом⁶.

Что представляется собой исследование по определению уровня ферментативной активности α-гал А?
Для определения ферментативной активности α-гал А можно использовать плазму крови, лейкоциты, культуру фибробластов или сухие капли крови^7,8. Для определения активности α-гал А в лейкоцитах и сухих пятнах крови применяют флюорометрические методы, однако сухие пятна крови можно исследовать также методом тандемной масс-спектрометрии^9–13. Согласно данным одного из исследований, уровень ферментативной активности α-гал А у мужчин с болезнью Фабри по результатам анализа сухих пятен крови составлял от 0 до 1,7 мкмоль/ч/л, тогда как у здоровых людей данный показатель варьировал в пределах от 4,2 до 17,3 мкмоль/ч/л¹⁴. Таким образом, для подтверждения диагноза болезни Фабри у мужчин в дополнение к генетическому исследованию можно выполнить исследование по определению ферментативной активности α-гал А^7,15–17. У женщин, гетерозиготных по мутациям гена GLA, уровень ферментативной активности α-гал А по результатам анализа сухих пятен крови варьировал в пределах от 0 до 12,6 мкмоль/ч/л, что сопоставимо со значениями показателя при отсутствии болезни Фабри¹⁴. По этой причине данный метод считается менее надежным для диагностики болезни Фабри у женщин, поскольку у многих пациенток уровень ферментативной активности α-гал А соответствует норме^15,16. Таким образом, для подтверждения диагноза болезни Фабри у женщин проводят генетическое исследование^7,16,17.

Насколько чувствителен метод диагностики болезни Фабри по уровню ферментативной активности α-гал А?
Относительную чувствительность методов диагностики болезни Фабри по уровню ферментативной активности α-гал А в сухих пятнах крови, уровню лизо-Gb₃, в плазме крови и данным секвенирования гена GLA для у мужчин и женщин с подозрением на наличие этого заболевания оценивали в рамках двухлетней программы клинических диагностических исследований. В этом исследовании уровень ферментативной активности α-гал А регистрировали в мкмоль/л/ч, при этом показатель ≤ 11 мкмоль/м/ч у мужчин считался низким. Чувствительность метода подтверждения предполагаемого диагноза болезни Фабри по уровню ферментативной активности α-гал А составила 100 % у мужчин и только 49 % у женщин. Согласно данным этого исследования, определение ферментативной активности α-гал А можно проводить в качестве первого этапа диагностического исследования у мужчин. По этой причине для диагностики болезни Фабри у женщин эффективнее применять комбинацию методов: определение уровня лизо-Gb₃ в плазме крови и секвенирование гена GLA¹⁸.